准确PCR结果，少不了电动移液器

使用Picus®电动移液器、Safetyspace低吸附滤芯吸头和滤芯吸头。Picus®使用多次分液模式。移取Master Mix时，将电动移液器速度参数设置为1。

qPCR准备

qPCR准备阶段使用Picus®电动移液器、Safetyspace滤芯吸头及低吸附滤芯吸头。Lo-Bind EP管用于DNA样品制备及Master Mix的制备。制备用于所有测试的PCR Master Mix储备液使用了MaximaSYBR Green qPCR Master Mix（不含ROX）、大肠杆菌uidA基因引物以及无核酸酶水。

用移液器将八个 15μL 的Master Mix重复样品移取至PCR板孔中，用于各种测试条件。无模板对照（NTC）样品不含大肠杆菌基因组DNA，并加入 5μL 无核酸酶水。用类似方法移取 5μL 含有1×106、1×105、1×104、1×103 以及1×102 个拷贝丨反应大肠杆菌gDNA的系列稀释标准品。

在每个测试孔中有 5μL 含有1×103 个拷贝丨反应的大肠杆菌gDNA。使用Picus® 电动移液器的多次分液功能及低吸附滤芯吸头以相同的方式将所有DNA样本添加到PCR管中。使用LightCycler®480 qPCR仪进行qPCR。循环参数如下：在 95°C下预培养 10 分钟，随后在 95°C 10 秒、55°C 10 秒、75°C 15 秒，75°C延伸 10 秒，40 次循环。

对标准品、对照品和样品中的SYBR绿色荧光激发进行定量。使用LightCycler® 480软件确定定量循环（Cq）值和实际拷贝数，并使用MS Excel分析结果。

数据分析

Cq值的百分比系统误差（%S）反映了处理Master Mix的仪器系统（移液器和吸头系统）Cq值的误差。移液过程中的随机误差是结果精准度的测量，反映了实验中重复样品之间的差异。Cq值的百分比随机误差（%R）反映了结果的重现性，并且可能受到实验人员移液操作的影响。

基于PCR原理的实验中使用电动移液器移取Master Mix可确保高准确度和精准度。此外，电动移液器可加快完成实验的速度，减少移液所需的时间，使操作更符合人体工程学。因此，使用电动移液器可以降低实验室工作人员患上重复性劳损（RSI）的可能性，并使实验更不容易出错，它还能在相同的实验中使用更少的移液器吸头，因此也是更环保的选择。