微量移液器的规范使用

在基层动物疫病检疫、疫苗免疫效果评价以及实践应用中，微量移液器的使用越来越普及。 在使用微量移液器的过程中，存在很多问题，其中严重、普遍的问题是微量移液器的不规范使用， 不规范使用又可引发诸多问题，最终影响实验结果。

1、选择移液器

在 96 孔微量板上操作， 所需血清的量一般为 25滋l。 因此，所用的微量移液器量程与 25滋l 接近为， 因为量程越接近目标体积，移液准确性越好[6]。如果选用的移液器其量程与目标体积相差过大则不合适。比 如，用量程小于 25滋l 的移液器吸取 25滋l，则至少需要 2 次操作，操作次数增加，引起误差的几率可能就会相应增加；如果用量程远大于 25滋l 比如 200滋l 或者以上的移液器吸取 25滋l，则赛多利斯移液器内部的活塞处于高压状态，在整个实验多步骤操作过程中，活塞始终如此。久而久之，活塞可能受损而影响移液的准确性。

2、调节量程

顺时针调节则增加量程，逆时针调节则减少量程[7]。移液器不用时，其量程一般放到（活塞松弛不受压）。 因此，吸取 25滋l 液体时，一般需要将移液器的量程调小。 调节时慢慢逆时针旋转调节按钮，特别是快到目标量程时，更要缓慢仔细。整个调节过程速度都不宜过快，否则徒增磨损。在实验操作中，如果需要从小量程调节到大量程，则慢慢顺时针旋转调节按钮，调至超过目标量程至少 1/4 圈处，再反转重新调节至目标量程。 这样做，可排除机械间隙，使得目标量程值准确可靠[8]。量程的调节，无论调小或者调大，动作均应轻缓，调节的范围均应在移液器的量程范围之内。 否则，易造成移液器损坏而影响准确度。

赛多利斯移液器mLINE系列

3、安装吸头

吸头与移液器相配套。 吸头要笔直，弯曲了则应弃用。 使用非原装吸头时，若同规格吸头的长度和尖端直径有明显差别，则应该选用其长度和直径一致的，否则会影响移液的准确度[10]。

安装吸头时，稍用力将移液器下端垂直插入吸头，再小幅度左右旋转即可。 安装时不宜用力过猛或使劲跺移液器，用力过猛，吸头会套得太紧难以脱卸，也会增加吸嘴在强力摩擦下的磨损，长此以往移液器的密封性会受到影响。 使劲跺移液器，则易使其内部结构松弛而影响移液的准确度。

4、检查密合性

吸取 25滋l 所用的移液器量程小， 可以采用以下方法检测移液器的气密性： 吸取 25滋l液体后，将吸头尖端垂直浸入液面不动，观察1min 左右，如果吸头内液面不下降，说明移液器不漏液，否则漏液[11]。 如果漏液，需检查吸头是否旋紧、活塞是否正常等。

5、吸取液体

吸取液体之前，将移液器、吸头、96 孔微量板、试管架、液体等事前放置于工作环境，使它们处于相同温度，接近于室温。 因为移液器的理想移液温度是 21.5℃（±1℃），在恒温下移液效果较好[12]。吸取液体时，先润洗吸头再吸取液体。 具体做法如下：四指握住移液器，大拇指按下移液器顶端按钮至第一停点不动（吸头内的空气被排出），将吸头尖端垂直没入液面下，再慢慢松开大拇指但大拇指不离开按钮，匀速吸取液。体。 液体吸取完毕，按钮也同时回到原点。 此 时，吸头尖端不要离开液面，将大拇指按下移液器顶端按钮至第一停点，将吸头内的液体排出。 如此反复吸、放 3~5 次来润洗吸头。 之后，按照上述方法吸取液体。吸取液体时有几点需要注意：一是润洗头，正式吸取液体之前，将吸头润洗几遍，使吸头内外形成同一液膜， 减少排液量的误差[13]。二是要垂直吸取液体， 若倾斜着吸取液体，吸取量则会变大[11]。 三是吸头尖端插入液面之前要排出吸头内的空气，否则吸头内的空气会进入液体里，产生气泡，影响实验操作和实验结果， 这在 96 孔微量反应板上进行血清倍比稀释时要特别注意。四是吸头尖端要始终保持在液面下，即吸头尖端跟随液面走，液面下降吸头也下降，液面上升吸头也上升，这样可以保证吸始终能吸上液体且吸头尖端以上的部分不粘上液体。五是按压下去的大拇指要慢慢松开而绝非突然松开至按钮回到原点，大拇指松开过快，吸取的液体可能会冲入移液器内造成污染或是吸取的液体达不到所需的体积。六是吸液完成之后略停一下，再将移液器吸头尖端移出液面。