3D细胞培养模型之移液优化方案

由于3D模型可以更准确地模拟真实组织或肿瘤中的细胞行为，在癌症研究等许多研究领域，对3D模型的研究兴趣正在不断增加。构建3D细胞培养模型比建立2D模型更具有挑战性，通常需要试验多种基质和技术，才能获得佳结果。

本研究重点放在利用微丝组装来模拟体内环境中的细胞外基质，以创建用于生物医学应用的功能性组织，目前正在开发一种体外乳腺癌模型，用于评估候选药物并作为生物医学研究的创新系统。

Q与其他 3D 基质相比，Biosilk™ 的主要优势是什么？

Biosilk™ 的主要优势在于细胞具有高度增殖性，对比封装于水凝胶中的细胞，可更有效地进行扩散。此外，Biosilk™ 可用于获得各种不同的支架，例如泡沫、膜和纤维。这些支架也可以相互组合，从而创建共培养系统。

初步研究结果表明，与2D培养相比，在3D Biosilk™ 中培养的相同类型细胞表现出更高的侵袭性标记。

Q 96孔板形式的 3D Biosilk™ 乳腺癌模型的详细描述

目标是获得3D模型，其中乳腺癌细胞生长嵌入Biosilk™ 泡沫。每个泡沫（厚度约130 μm，直径约700 μm) 培养在96孔板的孔中作为浮动3D构建体培养（见图1）。将Biosilk™ 泡沫培养一周，用于药物试验、增殖分析、基因表达水平测量和免疫荧光

目前，这一方法的主要局限是通量低，造成这一问题的原因在于创建每个泡沫需要：A. 使用单通道手动移液器（赛多利斯Mline® 移液器）；B. 创建在聚四氟乙烯（Teflon）表面上，然后分离 Biosilk™ 泡沫，并转移至96孔板。

目前，我们正在优化发泡方案以实现高通量。在该研究方向上，我正在将3D Biosilk™ 浮动形式与“半3D形式”进行比较，后者是指将泡沫直接超低附着于96孔板，并保持附着在底部。请参阅表 1 中有关增加通量的详细工作流程。这种格式也可与使用多通道电动移液器（例如赛多利斯Picus® Nxt 移液器）添加的细胞培养基兼容。下一步，我们将评估使用8通道Tacta® 移液器在半3D形式中直接将泡沫附着于96孔板；这似乎是非常有潜力的一种选择，既可以增加通量，又可满足我们快速混合的需求。

Q您测试赛多利斯Picus® Nxt 电动移液器的主要动机是什么？

主要原因是尝试采用一种新的、更高通量的方案，形成3DBiosilk™ 泡沫。与之前的方案相比，新方案的重要变化表现为：（1)使用Picus® Nxt 移液器（8通道，5–120μL）同时对8个。Biosilk™ 泡沫进行发泡处理；（2)发泡操作直接在96孔板中完成。

Q您在使用赛多利斯Picus® Nxt 电动移液器时是否遇到任何问题或困难？

移液器速度可能稍微有点低，无法产生类似于手动控制移液器所获得的泡沫。这样一来，3D结构中的气泡更大，从而导致终的Biosilk™ 泡沫整体稳定性较差。Picus® Nxt 移液器的增加速度选项设置可使得产生的气泡更小，由此使Biosilk™ 泡沫更稳定。

您对赛多利斯Picus® Nxt 电动移液器有何看法？

Picus® Nxt 移液器编程直观，重要的是，它在3D Biosilk™ 泡沫产品的规模化生产方面显示出了巨大潜力。目前，Biosilk™ 泡沫的手动起泡大约需要15秒。而一支8通道移液器将使我们的速度提高八倍。这将提高细胞存活率和操作员的人体工程学条件。

文章转自：公众号 赛多利斯实验室