赛多利斯电动移液器 正确移液对3D细胞培养的影响

在干细胞疗法及药物发现等研究领域，三维(3D)细胞培养越来受到人们的关注。然而，3D细胞培养的准备工作可能很困难，并且移液技术不良可能导致在3D细胞培养实验中产生巨大差异。Picus® Nxt移液器能够使样品制备的工作流程标准化并消除因个人移液操作导致的潜在负面影响，是水凝胶制备的理想选择。

移液技术不良会导致样品和实验间的重复性低。制备过程中所使用的水凝胶、移液器及吸头会使3D细胞培养物的制备具有挑战性，并且容易产生差异，但重要的影响因素是个人的移液操作。通过使用电动移液器，您可以用预设好移液速度和混合步骤的方案，尽可能减少因个体移液操作引入的差异。

材料和方法

细胞混合物制备

使用Picus® Nxt赛多利斯电动移液器、赛多利斯Safetyspace™滤芯吸头、赛多利斯Optifit吸头、GrowDex®水凝胶混合制备细胞混合物。

GrowDex®定量

通过荧光增白剂染色法对GrowDex®进行定量。

活细胞定量

使用基于甲臜的检测方法对细胞培养中的活细胞进行定量。

结果

充分混合可以改善 3D 细胞培养的结果

当使用Picus® Nxt移液器以中等混合速度（速度5）混合30 - 40次（图 1）来制备并移取 GrowDex®混合物时，3D 细胞培养重复操作之间的变异系数（CV%）低。按照该工作流程，当移取 100 μL 至 96 孔板时，CV< 3%。

另一方面，不细心的混合操作可能会产生气泡和泡沫，从而导致细胞数量变化增大，且细胞活力降低（图2）。同样地，混合操作不严谨也会导致终样品中水凝胶含量出现很大 差异（图 3）。

推荐使用赛多利斯 Safetyspace™滤芯吸头进行3D细胞培养的移液

建议在细胞培养应用中使用赛多利斯Safetyspace™滤芯吸头，因为滤芯能够降低交叉污染的风险。

使用单道Picus® Nxt 300 移液器将GrowDex®稀释液移取到 384 孔板上，过程中采用带孔板跟踪功能的多次分液模式（10 × 30 μL），以防止移液到错误的孔中（图 4）。使用同一个吸头进行总共 176 次重复移取。将 Safetyspace™吸头与低吸附Safetyspace™吸头进行比较。作为参考，使用低吸附Safetyspace™吸头移取 10% FBS-RPMI。